ABSTRACT
Abstract Contagious Ecthyma (CE) is a severe exanthematous dermatitis caused by the Orf virus (ORFV) that mainly affects domestic small ruminants such as sheep and goats. It is a worldwide-distributed occupational zoonosis, particularly infecting those in close contact with animals or animal products such as shepherds, farmers and veterinarians, among others. In the present work, we report the first human CE case confirmed in Argentina. A phylogenetic analysis based on four gene sequences of the isolated strain responsible for the disease showed that this isolate grouped with other ORFV sequences that caused reported CE cases in sheep from the same Argentine province. We also sequenced a sample from a Chilean human case reported in 2017, whose phylogenetic analysis showed that it groups together with other Argentine isolates from locations close to the border with Chile. Keywords: Contagious Ecthyma; Dermatitis; Human Orf; Zoonosis; Molecular characterization.
Resumen El ectima contagioso (EC) es una dermatitis exantemática grave causada por el virus Orf (ORFV), que afecta mayormente a pequeños rumiantes domésticos, como ovinos y caprinos. Es una zoonosis ocupacional con distribución mundial, infecta a humanos en estrecho contacto con animales o sus productos, como granjeros, esquiladores y veterinarios, entre otros. En este trabajo se informa el primer caso humano de EC confirmado en Argentina. Un análisis filogenético basado en cuatro genes de la cepa responsable de este caso mostró que el aislamiento agrupa con otras secuencias de ORFV que causaron casos en ovinos en la misma provincia argentina. También se secuenció una muestra del caso de ectima humano reportado en Chile en 2017 y el análisis filogenético mostró que dicho aislamiento forma un grupo con otros aislamientos argentinos de localidades cercanas a la frontera con Chile. Palabras clave: Ectima contagioso; Dermatitis; Orf en humanos; Zoonosis; Caracterización molecular.
ABSTRACT
Resumen En un estudio epidemiológico realizado previamente en Argentina, se analizó la secuencia de un fragmento del gen US5 del virus de la laringotraqueítis infecciosa (ILTV), lo que permitió diferenciar las cepas de campo de las vacunales. También esto permitió definir cinco haplotipos del ILTV, con variaciones específicas en las posiciones 461, 484, 832, 878 y 894 del gen US5. La caracterización de las cepas virales también puede lograrse mediante el análisis de la disociación de alta resolución o high-resolution melting analysis (HRMA), descripto como un método efectivo, rápido y sensible para detectar mutaciones en productos de PCR. En el presente estudio se desarrolló un protocolo de disociación de alta resolución con el objetivo de caracterizar cepas del ILTV circulantes en Argentina. Para ello,se confirmó la especificidad de esta herramienta en diferentes diluyentes del ADN de las muestras, sin observarse interferencias en presencia de ADN heterólogo u otros metabolitos celulares. Asimismo, la concentración de sales en el buffer de elución utilizado durante la extracción de ADN no alteró los perfiles de las curvas. Se obtuvieron perfiles bien definidos con concentraciones de ADN más elevadas (Ct = 26.0), mientras que concentraciones más bajas presentaron curvas heterogéneas (Ct = 32.5). El HRMA mostró una concordancia del 97.49% con la técnica de referencia, la secuenciación. El protocolo de disociación de alta resolución amplifica el ADN antes de su caracterización, por lo que esta técnica podría ser eventualmente utilizada para confirmar la presencia del ILTV y, al mismo tiempo, distinguir haplotipos, optimizando su valor como herramienta de diagnóstico. Esta característica implica una reducción significativa en el tiempo dedicado al procesamiento de muestras.
Subject(s)
Polymerase Chain Reaction , Herpesvirus 1, Gallid , DNA, Viral/genetics , Herpesvirus 1, Gallid/geneticsABSTRACT
La infección de los búfalos de agua (Bubalus bubalis) con los virus de la diarrea viral bovina (BVDV) ha sido confirmada mediante técnicas serológicas y moleculares en trabajos anteriores. Con el fin de determinar la presencia de animales persistentemente infectados y las especies y subtipos circulantes de BVDV en esta especie animal se realizó un estudio sobre una manada de búfalos de producción mixta con ganado bovino (Bossp.). Nuestros resultados serológicos mostraron un alto nivel de positividad frente a BVDV-1 y BVDV-2 dentro de la manada de búfalos. El análisis molecular sobre muestras de sangre de los animales serológicamente negativos reveló la presencia de ácido nucleico viral, lo que confirma la existencia de búfalos persistentemente infectados. El clonado y la secuenciación de la región 5 'UTR de algunas de las muestras obtenidas de búfalo reveló la presencia de coinfección natural con al menos dos subtipos diferentes de BVDV (1a y 1b) y con las especies virales BVDV-1 y BVDV-2
Infection of water buffaloes (Bubalus bubalis) with bovine viral diarrhea viruses (BVDV) has been confirmed in several studies by serological and molecular techniques. In order to determine the presence of persistently infected animals and circulating species and subtypes of BVDV we conducted this study on a buffalo herd, whose habitat was shared with bovine cattle (Bossp.). Our serological results showed a high level of positivity for BVDV-1 and BVDV-2 within the buffalo herd. The molecular analyses of blood samples in serologically negative animals revealed the presence of viral nucleic acid, confirming the existence of persistent infection in the buffaloes. Cloning and sequencing of the 5' UTR of some of these samples revealed the presence of naturally mix-infected buffaloes with at least two different subtypes (1a and 1b), and also with both BVDV species (BVDV-1 and BVDV-2)